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產(chǎn)品信息

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

本釋放劑可用于全血、血清、血漿、尿液、唾液、口腔拭子、鼻咽拭子、細(xì)胞懸液等動(dòng)物樣品，或根、莖、葉、花、種子等植物樣品的核酸（DNA、RNA均可）提取、富集、純化等步驟，核酸釋放劑處理后的裂解產(chǎn)物可直接用于Marathon DNA Polymerase（BT0016）的PCR擴(kuò)增，RPA核酸擴(kuò)增試劑盒，RT RPA核酸擴(kuò)增試劑盒和RPA核酸擴(kuò)增試劑盒（試紙條法）的等溫?cái)U(kuò)增。無須添加溶菌酶、溶葡萄球菌素或蛋白酶K等酶制劑，也無須使用酚、氯仿等有害化學(xué)試劑。一步、單管操作，方便快捷，操作時(shí)間不足1 min。靈敏度高，重現(xiàn)性好。用本試劑盒處理后，取1~15μL裂解產(chǎn)物上清液做模板進(jìn)行PCR，可穩(wěn)定擴(kuò)增添加量為10的1次方拷貝的靶基因?？捎糜谑称钒踩?、疾控、突發(fā)傳染病、動(dòng)物疫情、分子診斷、精準(zhǔn)用藥基因檢測(cè)前的樣品處理。

步驟：

1.動(dòng)物樣本

全血、血清、血漿、尿液、唾液、口腔拭子、鼻咽拭子、細(xì)胞懸液等樣品經(jīng)適當(dāng)處理后，按快閃核酸釋放劑（BT6008）：液體樣品=1：7的比例與待檢樣本混合即可。當(dāng)樣品濃度較低時(shí),建議裂解體系≥ 50 μL，即可確保證裂解產(chǎn)物內(nèi)含有可檢出的足量核酸樣品。

混合后的溶液用槍頭或一次性塑料吸管充分吸打20次后，吸取上清液至一干凈的離心管內(nèi)，待檢。

PCR、RPA或RT RPA擴(kuò)增時(shí)，裂解產(chǎn)物上清液可加至反應(yīng)體系允許的最大添加量。

2.植物樣本

待檢材料經(jīng)簡(jiǎn)單沖洗后，剪成2~5mm見方的小塊或小段，加入100μL的快閃核酸釋放劑（BT6008），并以槍頭碾壓待檢材料數(shù)次，對(duì)樣本進(jìn)行簡(jiǎn)單的破碎處理后，用槍頭或一次性塑料吸管充分吸打20次后，吸取上清液至一干凈的離心管內(nèi)，待檢。

PCR、RPA或RT RPA擴(kuò)增時(shí)，可吸取1μL的裂解產(chǎn)物上清液進(jìn)行檢測(cè)即可。

擴(kuò)增體系中裂解產(chǎn)物的添加量：如出現(xiàn)待檢樣品、陽(yáng)性對(duì)照及陰性對(duì)照樣品裂解后的檢測(cè)結(jié)果與實(shí)際不符的情況，可按裂解產(chǎn)物添加體積±2µL的梯度設(shè)置平行試驗(yàn)，確定同一擴(kuò)增體系內(nèi)裂解產(chǎn)物體積不同添加量對(duì)樣品、陽(yáng)性對(duì)照及陰性對(duì)照的檢測(cè)情況是否有影響，在確保陽(yáng)性對(duì)照檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，陰性對(duì)照檢測(cè)結(jié)果為陰性的情況下，選取最大的裂解產(chǎn)物添加量。因快閃核酸釋放劑具有抑制非特異性擴(kuò)增的作用，在陰性對(duì)照均檢測(cè)為陰性，陽(yáng)性對(duì)照均檢測(cè)為陽(yáng)性的情況下，可按擴(kuò)增體系的最大添加樣品添加體積添加裂解產(chǎn)物。

注意事項(xiàng)：

1.本釋放劑用于全血、血清、血漿、尿液、唾液、口腔拭子、鼻咽拭子、細(xì)胞懸液等樣品的核酸提取時(shí)，應(yīng)盡量在樣本采集后立刻完成樣本處理。如條件不允許，應(yīng)以冷藏或冷凍方式運(yùn)輸樣本。

2.如用于傳染性疾病樣本檢測(cè)時(shí)，操作時(shí)需注意安全防護(hù)，應(yīng)在規(guī)定的實(shí)驗(yàn)場(chǎng)所進(jìn)行，穿戴防護(hù)衣物、一次性手套和口罩等；所有直接接觸過病原物樣品的物品應(yīng)消毒后再丟棄或再次使用。

3.本釋放劑目標(biāo)為動(dòng)物液體樣本的快速粗處理，處理物可用于Marathon DNA Polymerase（BT0016）的PCR擴(kuò)增，RPA核酸擴(kuò)增試劑盒，RT RPA核酸擴(kuò)增試劑盒和RPA核酸擴(kuò)增試劑盒（試紙條法）的等溫?cái)U(kuò)增。處理物不可用于紫外分光光度定量等對(duì)核酸純度要求較高的實(shí)驗(yàn)。

4.快閃核酸釋放劑（BT6008）裂解樣品時(shí)，快閃核酸釋放劑（BT6008）為8×溶液，裂解體系為快閃核酸釋放劑（BT6008）：液體樣本=1：7，該比例經(jīng)反復(fù)優(yōu)化，切勿隨意調(diào)整！

5. PCR、RPA或RT RPA擴(kuò)增時(shí)，處理物上清液可加至反應(yīng)體系允許的最大添加量。擴(kuò)增模板為DNA時(shí)，-20℃保存的處理液上清液可于24 h內(nèi)多次、重復(fù)使用。PCR或RPA反應(yīng)的成功，與引物設(shè)計(jì)、循環(huán)參數(shù)或擴(kuò)增時(shí)間設(shè)置密切相關(guān)。如使用本試劑盒處理樣品后，擴(kuò)增失敗，請(qǐng)確認(rèn)用其它方法提取核酸的PCR或RPA反應(yīng)是否成功。

6.本試劑僅用于科研用途，請(qǐng)勿用于臨床、食品等。

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